产品货号:
SNM145
中文名称:
β-葡萄糖醛酸苷酶测定试剂盒(测外源型)
英文名称:
β-glucuronidase assay kit
产品规格:
50管/48样
发货周期:
1~3天
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β-葡萄糖醛酸苷酶(β-Glucuronidase,β-GD)作用于专一性底物释放出游离的酚酞,用比色法测定游离酚酞的量表示酶的活力。
β-葡糖醛酸苷酶广泛存在于机体组织中,除肝、脾、肾上腺外,胃肠道粘膜含量也较丰富,它具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖的生理功能。胃癌组织内此酶活力要显著高于十二指肠溃疡的胃组织,胃癌组织内此酶含量丰富,主要分布于癌细胞内;胃癌患者胃粘膜表面覆盖着具有此酶强活力的膜状物。这样当含丰富酶的癌细胞破碎时,胞浆中此酶即进入胃液。测定胃液β-葡糖醛酸苷酶活力对于研究胃癌有重要的意义。
组分 | 规格 | 保存 |
试剂一 | 3支 | 4℃ |
试剂二(外源性) | 15mL | |
试剂三 | 100mL | |
标准品粉剂 | 2支 | 4℃避光 |
标准品溶剂 | 2×5mL |
保存:4℃,避光
- 临用前每支试剂一(粉剂)中加入1mL的试剂二(外源性),充分混匀后-20℃以下保存。
- 2μmol/mL酚酞标准配制:用时每支标准品粉剂加一支标准品溶剂溶解,充分混匀,完全溶解后避光备用,现用现配。
- 前处理:
10%组织匀浆上清液的制备:准确称取组织重量,按重量(g):体积(mL)=1:9的比例,加入9倍体积的生理盐水,冰水浴条件下机械匀浆,2500转/分,离心10分钟,取上清液进行测定。 - 按下表加入各成分:
成分 空白管 标准管 测定管 双蒸水 50μL 2μmol/mL酚酞标准 50μL 10%组织匀浆 50μL 试剂一 50μL 试剂二 200μL 混匀后,37℃水浴1小时(准确计时) 试剂三 2mL - 混匀后,3500转/分,离心10分钟,取上清,540nm处,1cm光径,双蒸水调零,测定各管的吸光度值。
- 单位定义:每毫克组织蛋白在37℃条件下,每分钟能催化生成1μmol的酚酞的酶量就是1个酶活力单位。
- 计算公式:
β-GD活力
(U/mgprot)= OD值测定-OD值空白 × 标准品浓度
(2μmol/mL)÷ 反应时间
(60分钟)÷ 待测样本蛋白浓度
(mgprot/mL)OD值标准-OD值空白 - 计算举例:
取新鲜小鼠肝脏,制备成10%的肝脏匀浆,取样50μL按照操作表进行测定:空白管OD值0.017,标准管OD值0.350,测定管OD值0.201,10%小鼠肝脏蛋白含量9.65mgprot/mL,按照公式进行计算:β-GD活力
(U/mgprot)= 0.201-0.017 ×2÷60÷9.65=1.909×10-3U/mgprot 0.350-0.017
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